产品介绍
本产品是一种用于 Western Blot 时湿转快速转膜的缓冲液,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜上,试剂成分安全无毒害;可以使
用甲醇或者乙醇,能在 15-30 min 内完成转膜过程。
使用本产品转膜快速、产生的热量比较低,40 分钟内无需冰浴。在 400 mA 恒流转膜 15-30 min 即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至 PVDF 膜或硝酸纤维膜(NC 膜)等印迹膜上,产热较传统转膜缓冲液更低,对蛋白影响比较小,转膜效果与传统转膜一致或更佳。
操作步骤
1. 取每包快速转膜缓冲液粉剂溶解于 800 ml 超纯水中,加入 200 ml 无水乙醇或甲醇,充分溶解混匀(根据需求适当成倍配制);
2. 做好转印所需的三明治结构,从负极(黑色面)到正极(红色面)顺序为海绵、滤纸、凝胶、印迹膜、滤纸、海绵,然后转移至转印
槽中,设定恒流 400 mA,转膜时间 15-30 min(此条件针对 1.0 mm 厚的及 10%浓度的凝胶,如凝胶厚度为 0.75 mm,适当减少转
膜时间;如凝胶厚度为 1.5 mm,适当延长转膜时间)完成蛋白转膜。
保存条件
室温保存,二年有效,室温运输。
注意事项
1. 使用 PVDF 膜时,需提前用甲醇浸润 30-60 秒时间活化 PVDF 膜。
2. 不同胶的厚度及浓度会影响转膜的效率,1.5mm 厚度的凝胶及大于 10%浓度的凝胶,在推荐转膜时间的基础上需要延长 5-10 分钟。
3. 大于 200KD 分子量的蛋白质,转膜时间需要 40 分钟以上,根据需要适当优化转膜时间;40 分钟之后,可以在外槽添加冰浴来降
温。
4. 本产品适用于 Tris-glycine、Bis-Tris 等体系的蛋白凝胶的湿法转膜。
5. 由于使用转膜的电源和型号的不同,一方面最高电流差异较大,另一方面功率也会有较大差异。建议使用 400mA 转膜条件时,电源的最大电流能达到 600mA,否则会超过最大功率出现过载保护情况,影响转膜的效率。
6. 本产品正常颜色是白色粉末状颗粒。出现浅棕色或者黄褐色,应及时丢弃勿用。
7. 本产品仅限科研使用,勿用于其他用途