产品介绍
2× Universal SYBR Green qPCR Mix 为 2×预混液,包含除引物和 DNA 样品以外的所有 qPCR 组分,可减少操作步骤,缩短加样时间,降低污染风险。其核心组分是经抗体修饰的热启动 Taq
DNA 聚合酶,配合优化的 Buffer 体系以及 PCR 反应促进因子,使产品具有特异性强、扩增效率高等特点,有效抑制非特异性扩增,可对宽广浓度范围的模板进行准确定量,获得稳定可靠的qPCR 结果。
反应体系
操作步骤
a.根据引物的 Tm 值进行退火&延伸(退火)温度的设定;若扩增片段在 200 bp 以内,退火&延伸(延伸)时间可以设置为 15 sec;此外,退火&延伸(延伸)时间的设置还需根据您使用的
qPCR 仪所需要的最短数据采集时间自行调整。
b.不同 qPCR 仪的熔解曲线采集程序有差别,一般可使用仪器默认的溶解曲线采集程序。
优化建议
若使用默认反应条件反应性能不佳时,则需要进行反应条件的优化,可以从引物浓度及扩增
程序两个方面进:
1.引物浓度调整 当引物终浓物在 0.1 - 1.0 uM 范围之间变化时,引物浓度越低,扩增特异性越高,但扩增效率会有所下降。
2.扩增程序优化 需提高扩增特异性,可
使用两步法程序或提高退火温度;需提高扩增效率,可使用三步法程序或延长延伸时间。
保存条件
-20℃避光长期保存,且避免反复冻融。
注意事项
1. 因 Mix 中预混有染料,其保存或反应体系配制过程应避免强光照射。
2. 使用前上下颠倒轻轻混匀 Mix,请勿涡旋振荡混匀,避免产生过多气泡。