产品介绍
DualColor Protein Loading Buffer(双色蛋白上样缓冲液)是经过改良的以蓝色和红色的染料,5 倍浓缩的蛋白上样缓冲液(还原性)。本上样缓冲液含有稳定性更好,还原效果更优,没有难闻气味的 TCEP 作为还原剂,可以用于常规的 SDS-PAGE 蛋白样品的上样。
用于常规的 SDS-PAGE 电泳时,本产品中蓝色染料的迁移率与溴酚蓝一致,红色染料的迁移速度和蓝色染料相近。在 Tris-Glycine 电泳体系中,在 SDS-PAGE 的胶浓度低于 15%时,红色染料的迁移速度微快于蓝色染料,胶浓度高于 15%时,红色染料的迁移速度微慢于蓝色染料。
本产品可以用于转膜后的泳道示踪,双色蛋白上样缓冲液(5X)中含有的红色染料,该红色染料可随
蛋白转印到 PVDF 或 NC 等印迹膜上,从而可以用于泳道位置的指示,便于剪膜等操作。
操作步骤
1. 在室温或不超过 37℃的水浴中溶解双色蛋白上样缓冲液(5X),水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2. 按照蛋白样品和双色蛋白上样缓冲液(5X)以 4:1 的比例混合。
3. 100℃或沸水浴加热 5-10 分钟,以充分变性蛋白。
4. 冷却到室温后,直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可,然后开始电泳。
保存条件
-20℃保存,一年有效,冰袋运输。
注意事项
1. 本产品必须完全溶解后再使用。
2. 银染色 DTT 浓度样品中的应不超过 50mM。DTT 浓度过高样品可能导致凝胶的变黄或变黄
3. 本品双色蛋白上样缓冲液为还原性,不适合于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
5. 一般红色染料迁移速度比蓝色的快一点,但是较高浓度的 SDS-PAGE 胶中(比如 15%),红色染料迁移比蓝色慢,甚至出现红色拖尾现象,不影响下游实验。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。