ExpressCast PAGE 彩色凝胶快速试剂盒
产品介绍
ExpressCast PAGE 彩色凝胶快速试剂盒是一种采用上层胶和下层胶的新型预混液，在传统凝胶配方
基础上进行了优化，仅需加入改进型促凝剂即可制胶，无需加 TEMED，避免恶臭气味。该产品支持一步法灌胶制备，不仅简化和缩短凝胶配制步骤和时间，而且兼容传统的 Laemmli 体系中的 Tris-Glycine 电泳缓冲液，可以在高电压下快速完成蛋白电泳。上层胶的缓冲液中加入了红色指示剂，使加样孔清晰可见， 方便加样。
产品特色
一步法灌胶制备，仅需加入改进型促凝剂即可，无需加 TEMED，避免恶臭气味
制备红色的上层胶，胶孔清晰可辨，方便加样
缩短凝胶电泳时间，150V 条件下，40-60 分钟即可完成电泳
兼容传统的 Tris-Glycine 电泳缓冲液, 稳定性好，分辨率高，条带更加清晰
操作步骤
一步法灌胶制备：以 10%分离胶，制胶厚度 1.0mm 为例
1. 分别量取等体积的下层胶溶液 2.5ml 和下层胶缓冲液 2.5ml，轻柔混匀。
2. 分别量取等体积的上层胶溶液 0.75ml 和上层胶缓冲液 0.75ml，轻柔混匀（注意：由于红色颜料的理化性质，使用前请摇匀）。
3. 向步骤 1 的混合溶液中，加 50ul 改进型促凝剂，轻柔混匀，灌入制胶板内，使液面与短玻璃板上沿之
间的距离比梳齿长 0.5cm。(注意：溶液为过量，请勿全部灌入）。
4. 向步骤 2 的混合液中，加 15ul 改进型促凝剂，轻柔混匀，无需等待下层胶凝固，直接将混匀的溶液轻
缓灌入制胶板内，插入梳子。(注意：上层胶灌入时一定要轻缓，避免将上层胶溶液冲入下层胶溶液中）。
5. 等胶凝固后（约 20-30 min)，取出梳子，上样, 在 Tris-Glycine 电泳缓冲液体系中, 电压 150V, 电
泳 40-60 分钟。(注意：胶凝固后，上下层胶分界线平整度弱于常规两步法配制的胶，但对后续电泳没有影响，也可以按下述步骤常规两步法制胶）。
两步法灌胶制备：以 10%分离胶，制胶厚度 1.0mm 为例
（一）下层胶配制：以 10%分离胶，制胶厚度 1.0mm 为例
1. 分别量取等体积的下层胶溶液 2.5ml 和下层胶缓冲液 2.5ml，轻柔混匀。
2. 加入 50ul 改进型促凝剂至上述混合液中，混匀。
3. 将配制好的溶液，灌入制胶板内, 加入适量的醇或水，压平分离胶，待下层胶凝固后（15-30 分钟），
弃去上层水或醇，用滤纸吸取多余的水或醇。
（二）上层胶配制
1. 分别量取等体积的上层胶溶液 0.75ml 和彩色上层胶缓冲液 0.75ml，轻柔混匀。注意：由于红色颜料的理化性质，使用前请摇匀。
2. 加入 15ul 改进型促凝剂至上述混合液中，混匀。
3. 将配制好的溶液, 灌入制胶板内，缓慢插入梳子。
4. 待上层胶凝固后（15-30 分钟），取出梳子，上样, 在 Tris-Glycine 电泳缓冲液体系中, 电压 150V,
电泳 40-60 分钟。
成分及保存条件
注意事项：
1. 丙烯酰胺有神经毒性，请穿戴实验服及口罩经行相关的实验。
2. 本品加入红色颜料，上层胶浓缩效果比常规胶要弱，经过内部成分的优化，与传统凝胶相比，对蛋白条带分离效果更好，分辨率更高，蛋白条带更窄更锐利。
3. 改进型促凝剂的用量仅供参考，量越多的促凝剂可加速凝胶，反之亦然；凝胶速度与温度成显著正相关，
温度越高凝胶速度越快，温度越低凝胶速度越慢，实际用量根据个人实验习惯经验及环境适当调整。
4. 本产品已加入适量的 TEMED 替代品，如需要进一步提高凝胶速度，可按需补充适量 TEMED。
5. 为避免凝胶中气泡的形成，建议在配胶之前，使胶溶液及缓冲液平衡到室温（如室温放置几分钟）。
