您好,欢迎来到新赛美
分子生物学系列产品

高保真DNA聚合酶

高保真DNA聚合酶

货号:
M7005
规格:
5*1ml
目录价:
¥749.00
购买数量
+ -

2 x M7 Max Super Mix (Dye Plus) 

货号:Cat.No: M7005 Size:5 X 1ml 

产品介绍 

本产品包括通过基因改造技术实现快速扩增和超⾼保真的 DNA 聚合酶,延伸速度可达 4 kb/min。同时含 有 dNTPs、Mg2+、优化的反应缓冲液、PCR 反应的稳定剂等,浓度为 2×。由于使⽤的超⾼保真 DNA 聚 合酶具有极强的 3' → 5' 外切酶活性,与普通⾼保真酶相⽐,保真性更⾼,是普通 Taq DNA Polymerase 的 100 倍以上。DNA 扩增时,只需加⼊模板、引物和⽔,使 SuperMix 溶液的浓度为 1× 即可进⾏反应。 扩 增产物为平端,可直接⽤于⽆缝克隆实验。同时,反应产物可直接上样,通过琼脂糖凝胶电泳检测。本产品 包含红⾊电泳指示剂,指示带在 1% 琼脂糖凝胶中的迁移速率与 1.5 kb 双链线性 DNA 相当。 

适⽤范围: 

1. 超⾼保真 PCR 快速扩增,平端克隆,⽆缝克隆实验,基因定点突变。 

2. 低丰度模板、复杂模板或富含 GC/AT 模板的扩增。 

3. ⻓⽚段扩增 


产品特⾊ 

Ø 减少 PCR 操作时间

Ø 避免因多步操作带来的污染

Ø 优化的缓冲液,可⽤于低丰度模板、复杂模板或富含 GC/AT 模板的扩增 

Ø 基因组 DNA ⽚段的扩增(≤15 kb) 

Ø Plasmid DNA ⽚段的扩增(≤15 kb) 

Ø 热启动,⾼特异性 


操作说明 

推荐 PCR 体系(以 50ul 反应体系为例)

名称体积终浓度
2 X M7 Max Super Mix (Dye Plus) a25ul1 X
10 μM Forward Primer1ul0.2 uM
10 μM Reverse Primer1ul0.2 uM
PCR-grade WaterAs Required-
Template bAs RequiredAs Required
总体积50ul-

a.使⽤时彻底融化、混匀。 b.不同模板最佳反应浓度有所不同,下表为 50 ul 体系推荐的模板⽤量:

模板种类模板起始量
基因组 DNA10 - 400 ng
质粒 DNA10 pg - 5 ng
病毒 DNA10 pg - 10 ng
cDNA1 - 5 ul

PCR 条件

StepTemperatureDurationCycles
Initial Denaturation98°C30 sec1
Denaturation98°C10 sec25-35
Annealing c55-65°C30 sec25-35
Extension72°C15-30 sec/kb25-35
Final Extension72°C5 min1

c. 推荐使⽤退⽕温度 60°C。

保存条件 

-20 保存,有效期 24 个⽉。


保存条件常⻅问题与解决⽅案 

Ø ⽆产物或产物量少

1) 重复实验避免加样错误

2) 优化引物设计 

3) 设置退⽕温度梯度,优化合适的退⽕温度 

4) 使⽤⾼纯度模板并适当增加模板⽤量 

5) 适当增加延伸时间 

6) 增加循环数⾄ 35 - 40 个循环

7) 增加 Mg2+ 浓度⾄ 3-4mM  


Ø 有⾮特异性扩增产物或弥散条带 

1) 设置退⽕温度梯度,优化合适的退⽕温度 

2) 降低引物浓度⾄终浓度为 0.2 μM 

3) 优化引物设计 

4) 适当减少延伸时间 

5) 减少扩增循环数⾄ 25 - 30 个循环 

6) 使⽤⾼纯度模板并适当减少模板⽤量

Copyright © 2018-2028 苏州新赛美生物科技有限公司 版权所有 苏ICP备18026714号
技术支持: 苏州君联网络科技有限公司
在线客服
在线客服
二维码