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分子生物学系列产品

一步法高效逆转录试剂盒

NCMScript All-in-One RTpremix with dsDNase

货号:
M7100
规格:
100rxns
目录价:
¥399.00
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NCMScript All-in-One RTpremix with dsDNase 

一步法高效逆转录试剂盒

货号:Cat.No: M7100 Size100rxns 

产品介绍

NCMScript All-in-One RTpremix with dsDNase 一款含去除基因组酶的一管式高效逆转录产品,可将 RNA 逆转 录成为 cDNA,含有第一链 cDN 合成所需的所有试剂,只需加入 RNA 模板和水即可进行逆转录反应。合成 的第一链 cDNA(最长可达 15kd)可广泛用于文库构建、第二链合成、杂交、PCR 扩增、 RT-qPCR 检测等。 


产品组分 

组成成分M7010M7100 
5× RT Mix a40ul400ul 
All-in-one Enzyme Mix b30ul 300ul  
DEPC-treated H2400ul 2×1 ml


a. 包含 BufferdNTPsRandom Hexamer Primer/Oligo (dT)20 Primer Mix 

b. 包含 ExonScript Reverse TranscriptaseRibonuclease Inhibitor dsDNase


操作步骤 

1. RNase-free 离心管中配制如下混合液,轻轻混匀并瞬离以下成分

成分体积
10 pg- 5 μg Total RNA or 10 pg- 500 ng mRNA 按需
DEPC-treated H2O up to 13ul 
5×RT Mix d4ul
All-in-one Enzyme Mix3ul
总体积 20ul 

c. 为保证逆转录成功,请使用高质量 RNA 模板。 

d. 5× RT Mix 在使用前需充分混匀。 


2. 按照下表所示进行逆转录反应: 

反应温度反应时间目的
37°C e 2min 随机引物与RNA 模板配对及去除基因组DNA
55°C 15min逆转录反应及 dsDNase快速灭活
85°C5min逆转录酶灭活

 e. 复杂模板可以采用 25°C 10 min,充分让引物和模板结合。

3. 产物可立即用于 PCR qPCR,或-20°C 保存半年内使用;长期建议分装在 -70°C 保存;cDNA 避免反复冻融。 


运输和保存方式 

冰袋低温运输;-20°C 保存两年。

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