产品介绍
NcmBlot blocking buffer(快速封闭液)是一种即用型,高效快速应用于 Western Blot 等实验的封闭液。封闭 时间仅需 10 分钟,效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液,获得更高的信号,更低的背景值,信噪 比高。该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分,避免与抗体发生交叉反应,适用于磷酸化的抗体,但不可用 于生物素标记的抗体。
产品特色
即用型封闭液,无需配制 封闭时间短,仅需 10 分钟 背景低,信噪比高,优于常规奶粉等封闭的效果 不含哺乳动物来源的蛋白,适用于磷酸化的抗体
操作步骤
1. 完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中(可以不洗涤膜)。 2. 根据膜的大小,加入适量体积的 NcmBlot Blocking Buffer 封闭液,需完全浸没覆盖膜,对于 7.5x 8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。 3. 置于水平摇床上,室温条件下振荡孵育 10 分钟。 4. 取出封闭完成的膜,用洗涤液冲洗蛋白膜 2-3 次,即可用于一抗孵育等后续 western blot 实验。
保存条件
4℃保存,冰袋运输,至少 1 年有效;
注意事项
1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为 10 分钟。对于背景低的抗体,可以缩短到 5 分钟,而对于一些背景 非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为 30-60 分钟。 2. 没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验或抗体,可能需要具体情况考虑使 用其它更合适的封闭液,比如奶粉、BSA 等封闭试剂。 3. 信号弱或者无信号:有可能是上样量不足;转膜效率低;抗体效价低,特异性差等原因造成,需要根据实验 情况进行调整 4. 背景高:有可能是抗体使用量过多;蛋白膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被 污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整。 5. 本产品仅限于科研使用,实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。
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